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Bio-Way

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何提高外源蛋白在原核细胞里的表达水平,特别是可溶性表达?

如何提高外源蛋白在原核细胞里的表达水平,特别是可溶性表达?
求交流
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这问题问的。。。
这个问题是最困扰做蛋白表达与纯化的人的。具体事例具体分析,比如大肠杆菌表达蛋白本身表达量就大,但是表达的大都是包涵体,想要获得可溶性蛋白,就需要做复性,或是再设计实验时就想办法让其在上清中表达。一般就要通过基因优化,载体宿主优化筛选,表达条件优化,诱导条件优化等等。
这里有篇比较适合这个问题的文章,你可以看看:原核蛋白可溶性表达策略及实验方案
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
3楼2015-10-26 09:32:49
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提高表达量,要么在克隆上优化,要么在诱导表达上优化,后者更多一些,诱导时间,诱导温度,诱导剂加入时间,诱导剂终浓度这些都要优化。
2楼2015-10-26 08:57:56
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼2015-10-26 22:46:03
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liyang12039

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
前期构建个表达重组质粒,后面对诱导条件进行优化
5楼2015-10-27 12:55:08
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