| 查看: 5295 | 回复: 9 | |||
[求助]
急！PMD19T为载体，转化用大肠杆菌DH5a，提出来的质粒长度还到2000bp 已有4人参与
|
|
最近在做定量PCR的实验，所以需要含有目的片段的质粒做标准曲线，然后问题就来了 我是以pMD19T为载体连接，目的片段长度是120bp，转化用大肠杆菌DH5a，挑取单克隆后做菌液PCR，是以M13-47和RV-M做为通用引物，扩增出的片段为250bp左右，测序也是对的，获得了阳性克隆，到这里都很正常； 之后我用相应的菌液质粒小提，提出来的质粒长度还到2000bp，要知道载体本身长2692bp，加上目的片段应该接近3000bp,反复提了几次都是2000的片段，以质粒为模板用目的基因的特异性引物扩增，反而能得到一条3000bp左右的模糊条带，但是并没有目标片段，这里值得一提的是我之前得到过3000bp的正确长度的质粒，特异引物也是正确的，因为这个基因的定量PCR我已经进行了一半了 求大神指点啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有283人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nono2009: 金币-10, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:00:05
nono2009: 金币-10, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:00:05
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2015-10-23 11:09:07
肥猫p
木虫 (正式写手)
- 应助: 94 (初中生)
- 金币: 2763.1
- 散金: 145
- 红花: 10
- 帖子: 340
- 在线: 189.3小时
- 虫号: 1709733
- 注册: 2012-03-22
- 专业: 微生物资源与分类学
3楼2015-10-23 12:35:51
4楼2015-10-23 14:53:52
5楼2015-10-23 14:58:46
6楼2015-10-23 15:32:52
7楼2015-10-25 22:05:06
liping121200
铜虫 (小有名气)
- 应助: 30 (小学生)
- 金币: 129.7
- 红花: 1
- 帖子: 82
- 在线: 39.3小时
- 虫号: 4060168
- 注册: 2015-09-09
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2015-10-26 08:55:29
足下客
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 10
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1858.8
- 散金: 211
- 红花: 12
- 帖子: 888
- 在线: 110.4小时
- 虫号: 426612
- 注册: 2007-07-28
- 性别: MM
- 专业: 临床分子生物学检验
9楼2015-10-27 16:55:49
99蜗牛99
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 193
- 散金: 20
- 帖子: 66
- 在线: 30.8小时
- 虫号: 3942913
- 注册: 2015-06-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
10楼2015-12-30 10:57:42
