应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒构建
131/2返回列表12下一页
查看: 1349  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

真果粒

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒构建 已有2人参与

本人在构建质粒，但在连接片段后粗提发现提得的质粒除倒数第四泳道外均比对照低，这是个什么情况？求大神指导

质粒构建
20151020粗提验证.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
徘徊在街头，不知何去何从。
1楼 2015-10-20 21:41:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

厚德求是

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
啥叫粗提？你没用试剂盒吗？感觉是不是质粒降解了？还是把基因组啊，RNA提出来啦？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-20 22:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真果粒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-20 22:21:50
啥叫粗提？你没用试剂盒吗？感觉是不是质粒降解了？还是把基因组啊，RNA提出来啦？

化转后涂板，量比较大，直接用酚氯仿粗提。一般最上面的是细菌基因组，第二条带是质粒。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
徘徊在街头，不知何去何从。
3楼2015-10-20 22:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真果粒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 真果粒 at 2015-10-20 22:29:43
化转后涂板，量比较大，直接用酚氯仿粗提。一般最上面的是细菌基因组，第二条带是质粒。
...

是转化

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
徘徊在街头，不知何去何从。
4楼2015-10-20 22:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

厚德求是

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

构建质粒至少用试剂盒提取一下啊，你是不是没有加RNA酶？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2015-10-20 22:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

余文军

新虫 (正式写手)
DNA 的问题

发自小木虫Android客户端
回复此楼
6楼2015-10-20 23:12:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)
你是在挑重组子吧。按照常规碱裂解法抽提质粒的话，这个应该不是质粒被单切的原因，线性化质粒跑得慢一些。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-10-20 23:29:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真果粒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-10-20 23:29:15
你是在挑重组子吧。按照常规碱裂解法抽提质粒的话，这个应该不是质粒被单切的原因，线性化质粒跑得慢一些。

是在挑重组子，用的是单酶切。连接之前酶切的质粒跑胶没问题，酶切回收后的目的片段由于浓度较大跑胶有条较明显的杂带。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
徘徊在街头，不知何去何从。
8楼2015-10-21 00:11:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真果粒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 余文军 at 2015-10-20 23:12:48
DNA 的问题

具体是可能是哪里出了问题？谢谢😜

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
徘徊在街头，不知何去何从。
9楼2015-10-21 00:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tolobio

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:08:26
本帖内容被屏蔽
10楼2015-10-21 08:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 真果粒 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +8 February_Feb 2026-03-01 10/500 2026-03-01 16:48 by sunny81
[考研] 295求调剂 +6 19171856320 2026-02-28 6/300 2026-03-01 15:52 by jxstnuZYX
[考研] 0856调剂 +4 刘梦微 2026-02-28 4/200 2026-03-01 15:35 by 吸一口猫气
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭