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真果粒

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒构建 已有2人参与

本人在构建质粒,但在连接片段后粗提发现提得的质粒除倒数第四泳道外均比对照低,这是个什么情况?求大神指导

质粒构建
20151020粗提验证.jpg
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徘徊在街头,不知何去何从。
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真果粒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-20 22:21:50
啥叫粗提?你没用试剂盒吗?感觉是不是质粒降解了?还是把基因组啊,RNA提出来啦?

化转后涂板,量比较大,直接用酚氯仿粗提。一般最上面的是细菌基因组,第二条带是质粒。

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徘徊在街头,不知何去何从。
3楼2015-10-20 22:29:43
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查看全部 13 个回答

厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
啥叫粗提?你没用试剂盒吗?感觉是不是质粒降解了?还是把基因组啊,RNA提出来啦?

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2楼2015-10-20 22:21:50
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真果粒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 真果粒 at 2015-10-20 22:29:43
化转后涂板,量比较大,直接用酚氯仿粗提。一般最上面的是细菌基因组,第二条带是质粒。
...

是转化

[ 发自小木虫客户端 ]
徘徊在街头,不知何去何从。
4楼2015-10-20 22:30:33
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厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

构建质粒至少用试剂盒提取一下啊,你是不是没有加RNA酶?

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-10-20 22:45:45
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