应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
52/1返回列表
查看: 2592  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

runye2015

新虫 (小有名气)

[交流] 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？ 已有6人参与

如题
1、两三个月前提取的基因组总DNA ，一直在零下80度冰箱保存
2、左1为12500 的MARKER，左2-3两样本是为3个月前提取的，4-5两样本是为2个月前提取
3、0.8%的琼脂糖，90V 5分钟，然后170V 25分钟
4、麻烦大家看下，我的DNA 有没有降解，尾带很亮，如果后续做PCR-DGGE还有荧光定量PCR还有会不会有影响？
谢谢大家啦！

基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
基因组总DNA 琼脂糖凝胶电泳
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-17 14:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sdjnyxn123

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
底下这种带很可能就是RNA污染了，你加RNA酶了吗？或者加了但是酶的活性不好吧，跟RNA酶有关的东西要4°保存的
赞一下 回复此楼
15楼2015-10-20 10:01:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

秉秉的法兰西

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+1 2015-10-17 22:52:22
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-17 17:32:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+5 2015-10-18 09:46:21
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秉秉的法兰西 at 2015-10-17 17:32:48
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

人家是直接基因组DNA电泳，没有做PCR，哪来的引物啊，麻烦回答问题前把问题看清楚先？

言归正传，提取总DNA，不可避免会带入RNA的，所以有可能是RNA，不过也有可能是DNA降解所致，我的经验是提取的DNA只要没有重大失误还是可以用的，做PCR的时候稀释一下，稀释到10到100 ng/uL使用效果会比较好，祝你好运！
赞一下(2人) 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
3楼2015-10-17 20:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jianguochen

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+4 2015-10-18 09:52:44
一般DNA降解弥散的话，跟你这个图不同，有可能跟楼上说的一样，有RNA污染，而且还降解了，光看你的胶图的话，看得出纯度是有问题的，胶孔里有亮带，应该是有蛋白残留，你是用什么方法提取的呢，有用分光光度计测下么，可以用RNase消化，然后纯化下。免得Qpcr时RNA引入非特异产物。
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-17 21:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +3 材料cailiao 2026-03-21 3/150 2026-03-26 20:25 by sanrepian
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭