应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急，之前提质粒浓度正常，这段时间提出来浓度都很低为什么
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
53/1返回列表
查看: 5524  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急，之前提质粒浓度正常，这段时间提出来浓度都很低为什么 已有8人参与

已经将我的目地基因导入T载，提质粒进行后续实验，之前提的质粒都有200ng/ul左右，最近两次所提出的质粒浓度很低，只有50ng/ul。
质粒提取试剂盒肯定没问题，因为实验室其他同学也在做，都正常
之前几次和现在的区别就是我从同一个平板的不同区域挑的菌，这个菌都是来自同一根液体LB试管（难道当时我从液体接到平板的时候就挑了不同质粒拷贝数的菌液？）然后提出来浓度有200左右的菌平板上已经被我刮得很干净了，所以我换了另一个区域刮（总共四个区域），有没有可能是amp失效了，所以质粒丢失，那么我现在想到两个方法：
1.从原来那个刮完的平板上再刮菌转接平板，但如果是amp失效的情况下，那这个区域的菌质粒是不是也会丢失，如果是，那这个方法应该不能提高质粒浓度
2我当时提过一次原来区域菌的质粒，测了浓度有170多ng/ul，用了一部分，还有几ul。那我将质粒重新转化DH5a，会改善这个情况么？？？ 两个方法哪个更有效？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-16 11:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by liping121200 at 2015-10-17 09:52:01
挑菌挑的是单菌落，摇菌的时候也会加amp的呀，应该不会存在amp失效的问题，如果是amp失效，你的菌可能就摇不起来，即使摇菌不加amp你提出来的质粒就有问题了，很有可能提出来的就不是你想要的质粒。要是你之前170的 ...

那是为什么呢？我切过我提的质粒，有条带，只是很暗，但切出来的大小是对的如果不是amp失效，质粒部分丢失那不明白为什么平板上的菌提出来的质粒浓度会下降这么多？明明我提质粒的时候离下来的菌很多啊一般都是过夜每根试管取3ml菌液离心的
赞一下 回复此楼
22楼2015-10-18 15:52:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小小八八: 金币+2, ★有帮助 2015-10-16 12:04:02
本帖内容被屏蔽
2楼2015-10-16 11:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Eternity宇 at 2015-10-16 11:53:08
重新转的话比较稳妥一点儿，因为不知道你摇菌的时间和Amp加的量所以不太敢确定是不是摇的问题……

都是过夜摇菌，amp终浓度都是一样的，我提质粒提了很多次了，操作都是一样的，应该不是摇菌的问题，那我重新转化的话我的质粒浓度能提高回来吗？好怕质粒浓度就上不去了那我后面酶切连接都没法做了，已经做了4个月酶切连接，一点进展都没有，这几次提质粒发现质粒浓度都上不去
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-16 12:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)
还想问一下，我如果用提出来的浓度50多的质粒还是说要用浓度170多的质粒重新转化的话我的质粒浓度能提高回来吗？哪个效果更好？好怕质粒浓度就上不去了那我后面酶切连接都没法做了，已经做了4个月酶切连接，一点进展都没有，这几次提质粒发现质粒浓度都上不去
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-16 12:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283分材料与化工求调剂 +19 罗KAKA 2026-04-02 19/950 2026-04-02 23:01 by 马儿快快地跑
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:54 by pphmily
[考研] 化学070300-总分378-求调剂 +5 挪椅子的泡泡糖 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:20 by ZXlzxl0425
[考研] 求调剂，一志愿郑州大学材料与化工专硕，英二数二342分，求老师收留 +8 v12abo 2026-04-02 8/400 2026-04-02 20:53 by 1104338198
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +15 GENJIOW 2026-03-31 16/800 2026-04-02 17:56 by cyh—315
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +12 dongfang59 2026-03-27 12/600 2026-04-02 12:26 by ms629
[考研] 272求调剂，接受跨专业调剂！ +4 闲鱼卢 2026-03-31 4/200 2026-04-02 11:18 by guyan1000
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +5 shzhou_ 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:05 by olim
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突， 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 0856，269分求调剂 +8 有学上就行求求� 2026-03-30 11/550 2026-04-01 22:33 by 2026材料调剂
[考研] 086502化学工程342求调剂 +7 阿姨复古不过 2026-03-27 7/350 2026-04-01 16:14 by yanflower7133
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[考研] 283求调剂 +9 A child 2026-03-28 9/450 2026-04-01 14:20 by Jaylen.
[考研] 08工科，295，接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:02 by 逆水乘风
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭