| 查看: 2789 | 回复: 2 | ||
我是传奇456金虫 (正式写手)
|
[求助]
pGreen系列载体转化农杆菌出现问题 已有1人参与
|
|
具体情况是，pGreenII 62-SK系列载体，Kana抗性。将目的基因构建重组质粒后，在kana抗性LB中筛选阳性克隆，测序结果正确，然后进行农杆菌热激转化（质粒加入约1ug），涂在含Rif（10ug/ml）Kana(50ug/ml)的LB平板。48h后仅长了寥寥数个菌落，而control组pcambia2301长了很多。另外，目的载体同时还涂布了只含Kana(50ug/ml)的LB平板，也长了几十个菌落。 我想请问下，这种情况是为什么？是否是pGreen质粒本身问题？还是转化过程中质粒出现了问题？ 试了好几次，包括质粒浓度，Rif浓度的控制等，而长的仅有的几个菌落挑了摇培后，PCR也测不到目的片段。 还请各位大侠帮忙！！  另附载体图谱  pGreenII 62-SK.png |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有286人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
我欲乘风归去
木虫 (正式写手)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 3280.1
- 散金: 1055
- 红花: 26
- 帖子: 841
- 在线: 878.8小时
- 虫号: 3340869
- 注册: 2014-07-27
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
2楼2015-10-15 10:55:05
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-10-15 11:20:08
