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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求大神看下质粒双酶切图
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jiangpozi

新虫 (小有名气)

[求助] 求大神看下质粒双酶切图 已有7人参与

pci-neo质粒用XBaI 和ECORI 双酶切，左边三个是没有酶切的质粒，右边第一个是和第三个用的是buffer 4  第二个用的是buffer1 ，这个图有没有切开啊？哪个切开了呢？求大神分析下，要怎么改进呢？

求大神看下质粒双酶切图
质粒pcineo 酶切 9.14.jpg
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1楼 2015-10-15 10:28:06
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jiangpozi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by han3028730 at 2015-10-15 20:01:01
确认一下酶切位点是否唯一。
既然你的两个酶切位点只相聚20bp，那么不应该出现800bp的条带，出现了应该是内切酶在本不该作用的位置上作用，可能是buffer不合适导致星号活性。
考虑到这个因素，用buffer1的产物应 ...

质粒的酶切位点难道不是唯一的么？
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16楼2015-10-22 13:40:09
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jiangpozi

新虫 (小有名气)
求助啊！！！！！！！！！
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2楼2015-10-15 10:38:44
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han3028730

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-15 18:14:06
请问Marker是多大的？Marker没怎么分开。不能判断各个条带有多大。
个人感觉用buffer4的切开了，产生了较大和较小的两条带，而用buffer1的似乎是单酶切产物，不知道理论上双酶切之后的两条带和用buffer4的两条带是否一致。
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3楼2015-10-15 10:44:02
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2015-10-15 11:22:42
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