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求助钙转慢病毒包装与转染经验 已有1人参与
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| 各位大神帮帮忙我正在做慢病毒包装，求经验，我用的是三质粒系统，怎样提高慢病毒的包装效率？谢谢了 |
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kangaroo0513
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4楼2015-10-16 01:17:30
kangaroo0513
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2楼2015-10-15 01:29:26
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谢谢你啊，  ，你用的是10ml体系的我用的是小皿，4ml体系，实验室师兄做逆病毒转染，转染效率很高，老师给我的protocol，跟他的那个差不多，所以我的一些操作也类似，用的试剂盒也是钙转的，好像是国外的试剂盒，我的三个质粒也是老师给我的，pCMV-dR8.2,VSV-G还有一个目的质粒，我抽提的质粒目的质粒864ng，dr是432，vsv是890 ，我想问一下这三个质粒加入各加入多少呀，转染的时候加了喹啉，换液是12小时换一下，再过大概12小时换一下,培养液是2ml然后再24小时后收病毒放在4度冰箱，重新加入2ml培养24小时后再收病毒，把这个病毒跟前天收的病毒一起离心1500转，用它直接转染目的细胞了，因为我转染的是白血病细胞，转染效率能在10%之上，我就可以把它sorting出来了，我的问题是我本身的病毒包装效率不能达到70%上所以我的目的细胞转染率就很低了，我是实验小白啦 ，希望大神多多帮助我，第一次在小木虫上发帖求助，不知道怎么弄的，看到有人回复我，我还是挺开心的 |
3楼2015-10-15 10:10:30
18761615793
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5楼2015-11-13 16:44:37