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我心中有猛虎

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化大小不一致 已有4人参与

最近刚开始做抗体,在蛋白纯化上遇到问题,用的是pGEX-4T-3载体,带有GST,大小是26kd,我自己设计的抗原表位大小是13kd,但是蛋白纯化过程中纯化出来的蛋白大小为34kd左右,大小和预计的差太多,这个是什么原因造成的呢?
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我心中有猛虎

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-10-14 14:25:27
5KD也还差不太多吧

你的意思是没有问题?继续往下做吗?
3楼2015-10-15 16:21:29
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查看全部 7 个回答

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-10-15 18:10:38
5KD也还差不太多吧
2楼2015-10-14 14:25:27
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
我心中有猛虎: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-10-15 22:14:49
我心中有猛虎: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-10-26 09:24:10
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我心中有猛虎 at 2015-10-15 16:21:29
你的意思是没有问题?继续往下做吗?...

用其他方法鉴定下,确认下分子大小。你现在是用什么方法测定的分子量
4楼2015-10-15 17:00:45
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前做蛋白表达纯化时总碰上这种情况,一般比较小的差别是不会影响实验结果的。
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
5楼2015-10-16 09:21:06
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