应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 细菌RNA提取浓度低
41/1返回列表
查看: 3002  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ChenYFSCAU

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细菌RNA提取浓度低 已有1人参与

提取一革兰氏阴性菌的RNA，由于实验条件的要求，采用产毒素培养基（贫瘠培养基）进行摇菌16h后，抽提RNA，此时的菌液浓度已经超过OD600>2.0。在进行RNA抽提时候一直得到的量很低（低于50ng/ul）。
1/不论是用promega SV total RNA提取试剂盒还是用Trizol抽提，得到的量都低。抽提时候所用的菌液量为2mL，电泳时候为两条带。
2/怀疑是不是由于培养基贫瘠而使得RNA量太少，采用取6mL的菌液进行trizol抽提，得到的RNA量稍微提高了一些，在50-60ng/ul之间。但是电泳的时候只有一条带。。
请问，怎么提高我的RNA提取量和提取质量。会不会是培养基造成菌落RNA产量少以外，还使得其较难破壁？
ps：在LB培养基中提取RNA的时候得量适当。300ng/ul。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-05 22:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hohomina

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有没有试过加微量的溶菌酶先处理下再提？OD大于2的细菌应该十分浓，也有可能是细菌量太多，而trizol量有限，导致细菌被裂解的不彻底，所以RNA量低
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-12-25 15:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hohomina at 2015-12-25 15:29:29
有没有试过加微量的溶菌酶先处理下再提？OD大于2的细菌应该十分浓，也有可能是细菌量太多，而trizol量有限，导致细菌被裂解的不彻底，所以RNA量低

嗯。。。。都说到点子上了
赞一下 回复此楼
our story begins
3楼2016-01-28 10:45:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

加油girl321

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2019-03-22 00:20:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ChenYFSCAU 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +7 recruit123 2026-09-09 7/350 2026-09-16 15:07 by 防腐剂科技部
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 08:51 by SjQobnC04j06
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 07:48 by i0IGWqQuchto
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 07:03 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:27 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 04:51 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:11 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-16 03:26 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 02:02 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:23 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:47 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-15 18:11 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭