应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 细菌RNA提取浓度低
41/1返回列表
查看: 2952  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ChenYFSCAU

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细菌RNA提取浓度低 已有1人参与

提取一革兰氏阴性菌的RNA，由于实验条件的要求，采用产毒素培养基（贫瘠培养基）进行摇菌16h后，抽提RNA，此时的菌液浓度已经超过OD600>2.0。在进行RNA抽提时候一直得到的量很低（低于50ng/ul）。
1/不论是用promega SV total RNA提取试剂盒还是用Trizol抽提，得到的量都低。抽提时候所用的菌液量为2mL，电泳时候为两条带。
2/怀疑是不是由于培养基贫瘠而使得RNA量太少，采用取6mL的菌液进行trizol抽提，得到的RNA量稍微提高了一些，在50-60ng/ul之间。但是电泳的时候只有一条带。。
请问，怎么提高我的RNA提取量和提取质量。会不会是培养基造成菌落RNA产量少以外，还使得其较难破壁？
ps：在LB培养基中提取RNA的时候得量适当。300ng/ul。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-05 22:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hohomina

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有没有试过加微量的溶菌酶先处理下再提？OD大于2的细菌应该十分浓，也有可能是细菌量太多，而trizol量有限，导致细菌被裂解的不彻底，所以RNA量低
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-12-25 15:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hohomina at 2015-12-25 15:29:29
有没有试过加微量的溶菌酶先处理下再提？OD大于2的细菌应该十分浓，也有可能是细菌量太多，而trizol量有限，导致细菌被裂解的不彻底，所以RNA量低

嗯。。。。都说到点子上了
赞一下 回复此楼
our story begins
3楼2016-01-28 10:45:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

加油girl321

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2019-03-22 00:20:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ChenYFSCAU 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖？ +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭