应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
51/1返回列表
查看: 6750  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

冬日夏香

新虫 (小有名气)

[求助] 做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达 已有2人参与

新手一枚，最近刚开始做免疫荧光，出来的结果不知道怎么看蛋白究竟在哪里表达，有人能解释一下吗
蓝色是细胞核 红色和绿色是两种目标蛋白

做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
601 200-4+5+6.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-10-02 16:41:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-10-03 21:50:14
你的图中间有一个细胞有很明显的红色和蓝色的共定位，提示红色蛋白可能有核定位，但是其他的细胞不明显；同时红色和绿色几乎无法勾勒细胞形态，似乎不是胞浆蛋白或膜蛋白。然后我觉得你的红色和绿色荧光似乎很弱...可能是什么原因呢？

如果你蓝色是DAPI或者Hoechst等DNA染色剂，那么红色或绿色与蓝色的共定位提示该蛋白很可能是核定位的蛋白，你可以序列分析一下你感兴趣的蛋白是否有核定位序列（neuclear localization sequence），或者是否具有跨膜序列等指示可能是膜蛋白。

然后你抗体染色或加入标签标记你感兴趣的蛋白和其他已知的亚细胞器标志物共定位看看；

你还可以使用生化分离的方法分离不同的细胞组分确认你的目的蛋白是否有特别的定位...
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-10-03 00:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬日夏香

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lubuddy at 2015-10-03 00:30:21
你的图中间有一个细胞有很明显的红色和蓝色的共定位，提示红色蛋白可能有核定位，但是其他的细胞不明显；同时红色和绿色几乎无法勾勒细胞形态，似乎不是胞浆蛋白或膜蛋白。然后我觉得你的红色和绿色荧光似乎很弱... ...

非常感谢，回答的好详细啊。
另外我想确认一下，图中蓝色的是用DAPI染的细胞核，我的其他图片里面红色蛋白基本上都跟蓝色重合，是不是就能说明这个蛋白就是在细胞核中表达的呢？
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-03 14:40:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冬日夏香 at 2015-10-03 14:40:38
非常感谢，回答的好详细啊。
另外我想确认一下，图中蓝色的是用DAPI染的细胞核，我的其他图片里面红色蛋白基本上都跟蓝色重合，是不是就能说明这个蛋白就是在细胞核中表达的呢？...

嗯，如果红色和你的DAPI共定位很好，是提示了红色蛋白很可能是核蛋白。

如果需要进一步明确该蛋白是否是核蛋白，还需要其他实验手段进一步论证。
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-03 20:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
红色的是细胞核蛋白没跑
绿的看不清楚，把绿色荧光调亮点，或者抗体多孵育些时间
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2015-10-04 05:52:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 冬日夏香 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +3 zhn03 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:02 by Ainin_
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 总分293求调剂 +4 加一一九 2026-03-25 4/200 2026-03-25 12:56 by Dyhoer
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭