24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 254  |  回复: 0

ted790110

铜虫 (初入文坛)

[求助] 引子设计逻辑? 证明template是mRNA?

快被老板搞疯了

最近在做RT(reversetranscription不是real time) - PCR
材料是突变的原核杆菌,没有内外显子问题。
有拿去定序,结果在一个表现基因(暂称X基因) 末段缺了一小部份,
连同terminator sequence都没了。
就在猜会不会X基因的terminator sequence没了,transcription会接续到下一个表现基因(暂称Y基因),
然后做出X、Y基因连在一起的mRNA。

于是开始设计第一对A引子
小弟是在X基因放一个forward,Y基因放一个reverse,如果X、Y基因连在一起做mRNA,PCR就会有东西(第3条);
如果是正常的,X、Y基因就是分开两条的mRNA,PCR不出东西(第1、2条)。

因为正常的mRNA用A引子做RT-PCR没有东西
没办法知道是否真的有X、Y基因的mRNA (第1、2条),
于是在X基因中设计一对B引子(第5、6、7条),Y基因中设计一对C引子(第9、10、11条)
证明X、Y基因是否有transcription出mRNA。
(第4、8、12条是NC)
结果老板说我的RT-PCR结果无法让人信服是以mRNA为template。

这要怎么让人信服啊?

引子设计逻辑? 证明template是mRNA?
AUTO6762.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ted790110 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 +10 妮妮ninicgb 2026-04-04 10/500 2026-04-05 00:01 by 永字号
[考研] 283求调剂 +9 A child 2026-04-04 9/450 2026-04-04 23:35 by lqwchd
[考研] 考研调剂 +10 小sun要好运 2026-04-04 10/500 2026-04-04 23:14 by lqwchd
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +5 梁富贵险中求 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:51 by 无际的草原
[考研] +5 雾与海 2026-04-02 6/300 2026-04-04 19:53 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿0817化学工程与技术,求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 265求调剂 +20 梁梁校校 2026-04-01 21/1050 2026-04-04 00:38 by userper
[考研] 283分材料与化工求调剂 +29 罗KAKA 2026-04-02 29/1450 2026-04-03 23:56 by userper
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 321求调剂 +17 y-yh 2026-04-01 20/1000 2026-04-03 12:57 by y-yh
[考研] 调剂 +7 祉岷. 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:11 by 花呗还欠600
[考研] 一志愿陕西师范大学生物学317分 +5 1563日。 2026-04-02 5/250 2026-04-03 06:58 by ilovexiaobin
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +5 蓝笺片 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:37 by dongzh2009
[考研] 一志愿山东大学,085600,344 +7 魏子per 2026-04-02 8/400 2026-04-02 21:12 by 百灵童888
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 302求调剂一志愿北航070300,本科郑大化学 +8 圣日耳曼条 2026-04-01 11/550 2026-04-02 07:40 by chemdavid
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见