应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电泳图求助
111/2返回列表12下一页
查看: 321  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

xdcindy81

铜虫 (小有名气)

[交流] 电泳图求助

最近从鱼的肝脏中提取了少量DNA，在冰箱中放了4天后跑电泳，图像很奇怪！！希望大家帮忙给解释一下，多谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-09-01 10:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
放在多少摄氏度的冰箱？4还是－20？
提取完后加RNase了么？
研磨或者匀浆太剧烈导致DNA片段化严重的可能性比较大。
轻柔一些

[ Last edited by brightfuture01 on 2008-9-1 at 10:47 ]
赞一下(10人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2008-09-01 10:45:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
降解得厉害
可能是提的时候纯度不高
另外是放4度冰箱还是-20度呢？
纯度不高+放4度降解成这样其实很正常……

这是提取的时候的操作问题吧，另外提取所用的试剂、耗材都要是无菌的，否则很麻烦
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-09-01 10:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnnuwl

新虫 (正式写手)

讨论后得到

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
拖带是由于DNA降解
出现锯齿状是由于点样孔太差了
另外你的样品也不好
点样孔就有很多杂质
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-09-01 10:49:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
点样孔看起来发亮其实还有可能是跑不进胶
1、buffer的缓冲能力不够，我试过用0.5*TBE的跑PAGE，很难进去，因为0.5*适用于琼脂糖，PAGE要1*才够
2、胶太浓，跑基因组用0.5%~0.8%的跑吧~用1%就很难跑动了，虽然还是能跑
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2008-09-01 10:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xdcindy81

铜虫 (小有名气)

应该是

我是放在4度的冰箱，大家分析得都有一定道理；
多谢了
赞一下 回复此楼
6楼2008-09-01 17:32:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
降解了！！
回复此楼
细推物理须行乐。
7楼2008-09-01 20:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
另外点样是飘出来小部分！！
赞一下 回复此楼
细推物理须行乐。
8楼2008-09-01 20:41:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzxizh

铁杆木虫 (正式写手)
离子浓度强了
回复此楼
9楼2008-09-02 07:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
不管加还是没有加RNA酶，2h的电泳足以将RNA泳出胶了。
看来主要是胶的浓度的问题，造成胶孔有DNA滞留，也可能是有蛋白没有抽提彻底。不知道你提取DNA的方法是什么？传统的方法还是试剂盒？？
一般来说在冰箱中放置4天，不管是4度还是-20度，都不会有大的问题，只要抽提彻底的话，DNA还是相对稳定地多。
可以换用0.5%的胶在跑跑看，电泳时间也太长了一些。
赞一下(10人) 回复此楼
位卑未敢忘忧国。
10楼2008-09-02 08:02:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xdcindy81 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:11 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 kvewwGtKktqB 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:38 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:15 by My20PsvIExYO
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:46 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:35 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:24 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:13 by My20PsvIExYO
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 10:39 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭