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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电泳图求助
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xdcindy81

铜虫 (小有名气)

[交流] 电泳图求助

最近从鱼的肝脏中提取了少量DNA，在冰箱中放了4天后跑电泳，图像很奇怪！！希望大家帮忙给解释一下，多谢！！！
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1楼 2008-09-01 10:40:50
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
降解得厉害
可能是提的时候纯度不高
另外是放4度冰箱还是-20度呢？
纯度不高+放4度降解成这样其实很正常……

这是提取的时候的操作问题吧，另外提取所用的试剂、耗材都要是无菌的，否则很麻烦
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3楼2008-09-01 10:46:36
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
放在多少摄氏度的冰箱？4还是－20？
提取完后加RNase了么？
研磨或者匀浆太剧烈导致DNA片段化严重的可能性比较大。
轻柔一些

[ Last edited by brightfuture01 on 2008-9-1 at 10:47 ]
赞一下(10人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2008-09-01 10:45:37
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hnnuwl

新虫 (正式写手)

讨论后得到

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
拖带是由于DNA降解
出现锯齿状是由于点样孔太差了
另外你的样品也不好
点样孔就有很多杂质
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4楼2008-09-01 10:49:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
点样孔看起来发亮其实还有可能是跑不进胶
1、buffer的缓冲能力不够，我试过用0.5*TBE的跑PAGE，很难进去，因为0.5*适用于琼脂糖，PAGE要1*才够
2、胶太浓，跑基因组用0.5%~0.8%的跑吧~用1%就很难跑动了，虽然还是能跑
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5楼2008-09-01 10:58:51
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