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waller_mic

木虫 (小有名气)

[求助] 提取DNA 已有6人参与

marker为D2000，左侧为我提取的DNA样品，加了100ul Eluent洗脱，点5ul样品跑的电泳，条带应该还可以，可为什么用NANODROP测的浓度都在10ng/ul以下呢？

提取DNA
UVP06385Sept222015.jpg
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不要忘记人生就是要战斗到死
1楼 2015-09-23 09:16:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
waller_mic: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-26 08:51:46
判断DNA质量电泳是最好的方法，nanodrop只能作为参考，要以电泳结果为准。电泳判断浓度的方式可以与marker标准上样体积时最量的条带作对比，一般marker最亮100ng/ul，次亮50ng/ul，记住电泳结果是DNA,RNA浓度判断的金标准。
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12楼2015-09-24 20:10:49
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liping121200

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:32:21
你这个条带看起来还是不错的，我之前拿2uL跑电泳条带特别淡，拿来扩片段没有问题，你这个看条带做实验应该是没有问题了，估计是你测的数据有问题
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好好学习，天天向上
5楼2015-09-23 11:34:35
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飞奔的大象

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:33:24
DL2000的marker最亮的条带150ng
/5ul.其他条带50ng/5ul，如果是宝生物的。
你的样品浓度在20~30/5ul，nanodrop用水blank的测量值大于用洗脱液，可以自己验证，

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9楼2015-09-24 07:34:52
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普通回帖

waller_mic

木虫 (小有名气)
还有就是，这个样品是否可用？？
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不要忘记人生就是要战斗到死
2楼2015-09-23 09:17:26
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ufo29119690

金虫 (小有名气)
你是不是算错了？  这个应该可以用的

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3楼2015-09-23 09:28:32
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waller_mic

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ufo29119690 at 2015-09-23 09:28:32
你是不是算错了？  这个应该可以用的

怎么说？我是用nanodrop测的，需要设置些什么特殊的吗？
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不要忘记人生就是要战斗到死
4楼2015-09-23 10:58:15
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:32:47
溶解DNA的buffer应该是类似于TE的缓冲液吧，你blank之后，测一下缓冲液的浓度，nanodrop2000吧，应该不会出现问题的。实在不行就放大招，把你的样品稀释10倍测测看。
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6楼2015-09-23 11:54:52
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waller_mic

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liping121200 at 2015-09-23 11:34:35
你这个条带看起来还是不错的，我之前拿2uL跑电泳条带特别淡，拿来扩片段没有问题，你这个看条带做实验应该是没有问题了，估计是你测的数据有问题

可能是我们的仪器出问题了吧，我是要送去测序的

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不要忘记人生就是要战斗到死
7楼2015-09-24 06:11:38
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waller_mic

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-09-23 11:54:52
溶解DNA的buffer应该是类似于TE的缓冲液吧，你blank之后，测一下缓冲液的浓度，nanodrop2000吧，应该不会出现问题的。实在不行就放大招，把你的样品稀释10倍测测看。

我是用那个缓冲液做的blank，这样可以吗？
稀释这个方法还真没试过

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不要忘记人生就是要战斗到死
8楼2015-09-24 06:12:45
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zbxky

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
给你个英格恩生物电话010-68489824你可以咨询专业技术
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10楼2015-09-24 09:50:11
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