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puma2003铁杆木虫 (著名写手)
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sds-page浓缩胶 不能浓缩
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SDS-page 浓缩胶压缩不好,以前跑的时候 能成一条细线的,但现在老是粗粗的一条,不知道怎么回事,所有的试剂我都重新配了,不知道还有什么可能产生影响的因素?郁闷啊 我用的是索莱宝的marker 上样5微升,也是不能压成一条细线 这到底是怎么回事呢 |
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panfanbin
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司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 7-13 05:44
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在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。 所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素。 |
10楼2008-09-08 12:49:16
qgaoamtf
至尊木虫 (职业作家)
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reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
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电压、电流是否稳定? 或参考:http://www.helixnet.cn/thread-9330-1-1.html ![]() [ Last edited by qgaoamtf on 2008-8-31 at 21:51 ] |
2楼2008-08-31 20:55:51
3楼2008-09-01 10:35:53
4楼2008-09-01 21:41:28














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