| 查看: 5995 | 回复: 19 | |||
[交流]
配了一个PCR mix，当天有结果，放-20度几天之后，不能用了？
|
|||
|
最近PCR遇到一个奇怪的问题，哪位帮我分析一下，不胜感激： 因为每次PCR都要用到5*PCR buffer， 25mM MgCl2和10mM dNTP，所以配了一个400倍反应体系的mix，当天配完后，这个mix是好用的。然后我就把它存放在冰箱了（这个mix中没放taq酶）。可是几天后，用相同的模板，PCR仪，PCR程序，扩了40多个样本，结果只有一个样本有条带。我感觉PCR buffer， MgCl2和dNTP这三个混到一起不容易出问题,完全可以配个mix储存起来。是哪里出问题了啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
renzhiq
木虫 (小有名气)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 2106.1
- 红花: 9
- 帖子: 298
- 在线: 53.3小时
- 虫号: 1949303
- 注册: 2012-08-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
liyueyue: 金币+5 2016-01-15 12:39:47
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
liyueyue: 金币+5 2016-01-15 12:39:47
|
他应该想表达的是400倍反应体积，50ul*400 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-09-23 07:46:30
xiaoyanzi517
铜虫 (小有名气)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 191.7
- 红花: 1
- 帖子: 91
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 1410739
- 注册: 2011-09-21
- 专业: 生物化学
13楼2015-09-23 23:17:27
2楼2015-09-22 20:40:15
 |
3楼2015-09-22 21:17:21
4楼2015-09-23 04:05:16
阿Q~~
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 77 (初中生)
- 金币: 33343.6
- 红花: 107
- 帖子: 36186
- 在线: 1028.1小时
- 虫号: 3237212
- 注册: 2014-05-27
- 性别: MM
- 专业: 宇宙学
5楼2015-09-23 06:55:47
6楼2015-09-23 06:59:11
renzhiq
木虫 (小有名气)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 2106.1
- 红花: 9
- 帖子: 298
- 在线: 53.3小时
- 虫号: 1949303
- 注册: 2012-08-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
liyueyue: 金币+5 2016-01-15 12:39:42
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
liyueyue: 金币+5 2016-01-15 12:39:42
|
你这个现象确实有点奇怪，如果说某种成分变了，应该所有的都扩增不出来，可你又有一个扩增出来了。奇怪…… 我以前也会自己配mix，并且我从来都是把Taq酶也加进去的，但从来没有遇到过这种情况。 请问你储存在4℃还是-20℃？我存放在4℃，如果说你存放在-20℃，有不有可能是没有完全融化？导致这种结果？ 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-09-23 07:42:32
asked6188
木虫 (职业作家)
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 4249.8
- 散金: 1283
- 红花: 15
- 帖子: 3020
- 在线: 635.7小时
- 虫号: 1068268
- 注册: 2010-08-02
- 性别: GG
- 专业: 物理学II
9楼2015-09-23 08:40:32
zergbloody
铁虫 (正式写手)
- 应助: 35 (小学生)
- 金币: 1260.6
- 红花: 2
- 帖子: 682
- 在线: 155小时
- 虫号: 1355427
- 注册: 2011-07-25
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
10楼2015-09-23 21:12:35
30