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配了一个PCR mix,当天有结果,放-20度几天之后,不能用了?
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最近PCR遇到一个奇怪的问题,哪位帮我分析一下,不胜感激: 因为每次PCR都要用到5*PCR buffer, 25mM MgCl2和10mM dNTP,所以配了一个400倍反应体系的mix,当天配完后,这个mix是好用的。然后我就把它存放在冰箱了(这个mix中没放taq酶)。可是几天后,用相同的模板,PCR仪,PCR程序,扩了40多个样本,结果只有一个样本有条带。我感觉PCR buffer, MgCl2和dNTP这三个混到一起不容易出问题,完全可以配个mix储存起来。是哪里出问题了啊? |
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renzhiq
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他应该想表达的是400倍反应体积,50ul*400 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-09-23 07:46:30
xiaoyanzi517
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4楼2015-09-23 04:05:16
阿Q~~
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你这个现象确实有点奇怪,如果说某种成分变了,应该所有的都扩增不出来,可你又有一个扩增出来了。奇怪…… 我以前也会自己配mix,并且我从来都是把Taq酶也加进去的,但从来没有遇到过这种情况。 请问你储存在4℃还是-20℃?我存放在4℃,如果说你存放在-20℃,有不有可能是没有完全融化?导致这种结果? 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-09-23 07:42:32
asked6188
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