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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE 问题
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一城之主耀

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 问题 已有4人参与

我提的是微藻的总蛋白，液氮研磨，裂解液溶解。可是每次条带斗跑不出来。这次跑出来的只有很浅的条带，也挺多的，就是发现浓度不够而且出来拖尾现象。求助各位大神的帮助，一个月了，苦恼ing！！！

SDS-PAGE 问题
IMG_0288.JPG
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1楼 2015-09-19 12:49:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

642625043

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
一城之主耀: 金币+10, ★有帮助 2015-09-22 09:19:21
可能是你提的蛋白里面杂志太多，可以查查文献找找蛋白质纯化的方法
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7楼2015-09-20 14:38:39
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普通回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个感觉应该是你样品的问题，marker跑的还可以。裂解液里有些什么成分呢？
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2楼2015-09-19 14:14:06
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一城之主耀

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-09-19 14:14:06
这个感觉应该是你样品的问题，marker跑的还可以。裂解液里有些什么成分呢？

裂解液：尿素，硫脲，TeitonX-100，蛋白酶抑制剂，CHAPS； 还有就是maker也是有一点儿拖尾现象的。
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3楼2015-09-19 14:17:54
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a86052

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一城之主耀 at 2015-09-19 14:17:54
裂解液：尿素，硫脲，TeitonX-100，蛋白酶抑制剂，CHAPS； 还有就是maker也是有一点儿拖尾现象的。...

有没有试试把裂解液除掉后制样电泳？左侧的marker虽有一点拖尾，不过也可以了，胶本身应该问题不大
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4楼2015-09-19 14:34:58
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一城之主耀

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by a86052 at 2015-09-19 14:34:58
有没有试试把裂解液除掉后制样电泳？左侧的marker虽有一点拖尾，不过也可以了，胶本身应该问题不大...

直接做过用硫脲和尿素，超声破碎去提藻全蛋白，结果也是这样。还有就是会不会是微藻本身的盐粒子浓度高或者是藻的色素影响结果呢？谢谢
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5楼2015-09-19 21:22:04
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自然_法则

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
一城之主耀: 金币+15, ★有帮助 2015-09-22 09:19:35
marker还可以，但也有轻微拖尾现象，制胶没问题，跑电泳的电压是多少呢，考虑下是否是电压过高

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
6楼2015-09-20 13:39:14
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lixihailove

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2015-09-20 16:42:59
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jim326

金虫 (正式写手)
蛋白样品质量不高。上样前煮了吗，煮完之后离心了吗？

发自小木虫IOS客户端
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9楼2015-09-20 17:17:17
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匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
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10楼2015-09-20 18:01:49
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