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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？
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杨晓君颖

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？ 已有5人参与

试了好几次了，都是这个样子，好难看，后面那条深深的背景是什么意思，有人知道原因吗?

请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-1
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-2
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-3
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-4
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-5
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-6
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请问一下我的聚丙烯酰胺胶跑成这个样子，到底是什么原因？-7
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1楼 2015-09-17 20:07:53
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杨晓君颖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 199006287956 at 2015-09-18 12:21:27
就是这个样子的。

不是啊，我同学跑的都没有背景只有条带，就像Marker那样的呢。
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3楼2015-09-18 17:54:01
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大小白白

新虫 (初入文坛)
可能是退火温度太低，错配率太高，适当提高退火温度条带就少了，你可以试试不同退火温度，做几个阶梯温度对比下

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

杨晓君颖
16楼2015-09-19 17:43:10
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)
你看看你的mix 是聚丙烯酰胺的还是琼脂糖的，我之前用琼脂糖的跑聚丙烯酰胺跑出来就是你这个样子的

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竹杖芒鞋轻胜马，谁怕，一蓑烟雨任平生；回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴
19楼2015-09-20 12:39:03
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普通回帖

199006287956

木虫 (著名写手)
就是这个样子的。

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追求不惜，奋斗不息
2楼2015-09-18 12:21:27
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫
有可能是样品没处理好，或者样品缓冲

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谨言慎行
4楼2015-09-18 19:32:39
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阿维victor

银虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:29:22
有人说那个是扩增的时候石蜡油放多了。你也可以试试银染时间减少一点。

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5楼2015-09-18 19:34:24
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杨晓君颖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoumin-09 at 2015-09-18 19:32:39
有可能是样品没处理好，或者样品缓冲

样品缓冲是什么意思？
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6楼2015-09-18 20:34:28
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杨晓君颖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 阿维victor at 2015-09-18 19:34:24
有人说那个是扩增的时候石蜡油放多了。你也可以试试银染时间减少一点。

我放石蜡油的和不放石蜡油的都试过了，还是一样的，银染是10分钟，试过9分钟的，显影的时候条带还没出来，那个深深的背景就先出来了。
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7楼2015-09-18 20:36:32
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阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 杨晓君颖 at 2015-09-18 20:36:32
我放石蜡油的和不放石蜡油的都试过了，还是一样的，银染是10分钟，试过9分钟的，显影的时候条带还没出来，那个深深的背景就先出来了。...

你样应该不大好吧，pcr跑出来直接点掉的还是藏两天点的？

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8楼2015-09-18 23:55:04
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schkk

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR多少循环？好像是循环多了

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9楼2015-09-19 10:14:48
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 杨晓君颖 at 2015-09-18 20:34:28
样品缓冲是什么意思？...

也就是样品缓冲液的性质，特别是PH的影响，还是挺大的
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谨言慎行
10楼2015-09-19 10:45:42
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