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Pipig金虫 (小有名气)
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【TAIL-PCR】对于其测序结果的分析问题 已有2人参与
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请问有做过TAIL-PCR 的朋友吗？ 在把扩增得到的序列送测序后，改如何分析呢。请说一下详细步骤。 发自小木虫Android客户端 |
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kobe199613
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【答案】应助回帖
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TAIL-PCR（thermal asymmetric interlaced PCR），即交错式热不对称PCR，是一种染色体步移技术（Genome Walking）。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环，利用不同的退火温度选择性地扩增目标片段，所获得的片段可以直接用做探针标记和测序模板。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-17 01:41:47
3楼2015-09-17 12:40:47
Pipig
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4楼2015-09-20 22:42:12
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是 |
5楼2015-09-20 23:40:00
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6楼2015-09-21 00:07:27
7楼2015-09-21 21:39:17
Pipig
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8楼2015-09-21 23:26:39
你好，我想问一下你，关于tail-pcr测序结果比对的问题，你解决了吗？因为我现在遇到了相关问题，想从你这获取点经验。希望你能帮我解答一下我的问题  我的问题是 tail-pcr的测序结果我是用DNAman进行比对的，向左侧扩增的序列结果，按理来说应该反向互补后进行比对，能比对上已知序列5'端的部分序列，对吧？向右扩增的序列结果，直接拿来与已知序列进行比对就行，对吧？ 问题是，比对序列时，扩增的序列在与已知序列重叠一部分后（约20-70bp），就不会再有重叠序列了，这是正常的吗？例如，已知序列是1-500bp，左侧扩增序列是1-800bp，扩增序列的600-630bp能与已知序列的1-30bp重叠，之后的630-800bp就不能喝已知序列30bp以后的序列重叠，这是正常的吗？ 谢谢你，看能否帮忙解答一下？  |
9楼2016-03-08 11:36:23
10楼2017-11-26 10:11:02
