应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 双抗夹心ELISA灵敏度
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
291/3返回列表123下一页
查看: 3117  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ayiyaya

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 双抗夹心ELISA灵敏度 已有2人参与

包被抗体+重组抗原+生物素标记抗体+SA-HRP，包被液、抗稀都是通用配方，用了生物素-亲和素系统放大，但是灵敏度依然达不到项目要求，求优化系统的方法！！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

专业相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-09-16 15:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

huajiahu

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
生物素和亲和素标记理论上应该可以达到pg级，若达不到可能标记不成功，所以可以加大标记抗体的量，其次抗体特异性好坏了，用的是双抗体夹心法，就需要一步步排除，所以需要两种抗体都得标记检查两种抗体的特异性或者给抗原标记来检测两种抗体的特异性，有时抗体特异性不好，标记的再好也无卵用

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-11-09 13:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ayiyaya

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
5楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-09 13:12:27
生物素和亲和素标记理论上应该可以达到pg级，若达不到可能标记不成功，所以可以加大标记抗体的量，其次抗体特异性好坏了，用的是双抗体夹心法，就需要一步步排除，所以需要两种抗体都得标记检查两种抗体的特异性或者 ...

用HABA法和ELISA（SA包被）检测过标记效果，生物素肯定是标记上了，但是做双抗夹心的时候，灵敏度还不如直接标记HRP。生物素用的是中长臂的，应该也没有问题。现在根本不知道问题出在哪里···
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-11-10 12:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rambo_wy

新虫
生物素连接抗体的时候，是否有出现蛋白的聚集现象？
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2016-02-11 19:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ayiyaya

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
生物素-亲和素放大系统没效果，求大神指点！！！
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-24 08:44:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huajiahu

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
楼主，不知道，你要求的灵敏度是多少？pg级吗？
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-06 16:37:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ayiyaya

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-06 16:37:59
楼主，不知道，你要求的灵敏度是多少？pg级吗？

是的，pg级，高值才几十pg···
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-08 22:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huajiahu

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
6楼: Originally posted by ayiyaya at 2015-11-10 12:12:10
用HABA法和ELISA（SA包被）检测过标记效果，生物素肯定是标记上了，但是做双抗夹心的时候，灵敏度还不如直接标记HRP。生物素用的是中长臂的，应该也没有问题。现在根本不知道问题出在哪里···...

灵敏度不如hrp我觉得应该不会啊，sa与hrp的标记有没有问题啊？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-10 12:25:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ayiyaya

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
7楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-10 12:25:53
灵敏度不如hrp我觉得应该不会啊，sa与hrp的标记有没有问题啊？
...

标记应该没有问题的，HRP标记用的高碘酸钠法，生物素是按照thermo的说明书做的···
生物素标记抗体也能做，就是显色效果不大好···
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-10 19:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiyue122

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
首先，你要确定你的两个抗体的配对效果怎么样，如果配对效果不好，你标记在好，灵敏度也不会搞的，然后检查配对之后，两个抗体能否反应，因为标记没有控制好，抗体的效应可能会下降的
赞一下 回复此楼
9楼2015-12-14 10:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ayiyaya

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
9楼: Originally posted by feiyue122 at 2015-12-14 10:53:31
首先，你要确定你的两个抗体的配对效果怎么样，如果配对效果不好，你标记在好，灵敏度也不会搞的，然后检查配对之后，两个抗体能否反应，因为标记没有控制好，抗体的效应可能会下降的

抗体的配对效果还行，现在的问题主要是生物素-亲和素放大系统没有效果，同样的一对抗体，标记生物素的灵敏度还不如直接标记HRP...
赞一下 回复此楼
10楼2015-12-14 13:41:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ayiyaya 的主题更新
291/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂：一志愿：南京大学 专业：0705 总分320 ，本科985，四六级已过 +3 lfy760306 2026-03-31 3/150 2026-04-01 01:57 by Creta
[考研] 材料调剂 +6 一样YWY 2026-03-31 6/300 2026-04-01 01:28 by 1018329917
[考研] 359求调剂 +7 邓邓邓书书 2026-03-25 7/350 2026-03-31 23:15 by fs26jie
[考研] 342求调剂 +7 Mary Keen 2026-03-28 7/350 2026-03-31 20:36 by 83503孙老师
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分，英语已过四六级，六级521，求调剂 +10 美味可乐鸡翅 2026-03-26 11/550 2026-03-31 19:20 by syh9288
[考研] 生物学296求调剂 +8 汤圆包 2026-03-29 12/600 2026-03-31 17:05 by 18828373951
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +6 Ong3 2026-03-27 6/300 2026-03-31 15:18 by yanflower7133
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 英一数一总分334求调剂 +4 陈阳坤 2026-03-31 4/200 2026-03-31 14:22 by 记事本2026
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 311求调剂 +10 lin0039 2026-03-26 10/500 2026-03-30 10:26 by herarysara
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-29 20:21 by dophin1985
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 8/400 2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭