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ayiyaya

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[求助] 双抗夹心ELISA灵敏度已有2人参与

包被抗体+重组抗原+生物素标记抗体+SA-HRP，包被液、抗稀都是通用配方，用了生物素-亲和素系统放大，但是灵敏度依然达不到项目要求，求优化系统的方法！！！

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1楼2015-09-16 15:49:46

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ayiyaya

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引用回帖:

5楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-09 13:12:27
生物素和亲和素标记理论上应该可以达到pg级，若达不到可能标记不成功，所以可以加大标记抗体的量，其次抗体特异性好坏了，用的是双抗体夹心法，就需要一步步排除，所以需要两种抗体都得标记检查两种抗体的特异性或者 ...

用HABA法和ELISA（SA包被）检测过标记效果，生物素肯定是标记上了，但是做双抗夹心的时候，灵敏度还不如直接标记HRP。生物素用的是中长臂的，应该也没有问题。现在根本不知道问题出在哪里···