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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 双抗夹心ELISA灵敏度
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rambo_wy

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by ayiyaya at 2016-02-15 11:29:48
没有浑浊，一直是无色澄清溶液。...

连接条件如何？ph？
感觉是连接问题，是不是连接以后透析或者超滤出的问题？若为超滤，可尝试透析，效果会好一点
不知你现在做的结果是否好一些了？
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21楼2016-02-15 19:06:42
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ayiyaya

金虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by rambo_wy at 2016-02-15 19:06:42
连接条件如何？ph？
感觉是连接问题，是不是连接以后透析或者超滤出的问题？若为超滤，可尝试透析，效果会好一点
不知你现在做的结果是否好一些了？...

用的pH 7.4的PBS偶联，然后透析。现在没有重点做这个了，需要的时候就直接按照说明书给的procedure做的。
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22楼2016-02-16 08:58:47
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autubio-yang

铜虫 (小有名气)
我也在做这个，一样的反应体系,灵敏度没问题，就是背景高，好头疼

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23楼2016-02-18 22:40:24
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sangsenhua

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by ayiyaya at 2016-01-27 08:34:10
二抗连biotin，然后买的SA-HRP。...

二抗连biotin？，一抗就要连了吧，然后用链酶亲和素
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24楼2016-03-23 16:37:06
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ayiyaya

金虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by sangsenhua at 2016-03-23 16:37:06
二抗连biotin？，一抗就要连了吧，然后用链酶亲和素...

呃···之前人家问的时候说的二抗，我也没在意···反正就是检测抗体连biotin...
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25楼2016-03-24 08:51:27
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记小忆儿

金虫 (小有名气)
是细胞提取物做的吗？

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26楼2016-03-24 14:57:36
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记小忆儿

金虫 (小有名气)
如果是细胞提取物做的，可以推荐一款适合细胞的试剂盒

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27楼2016-03-24 14:58:30
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ayiyaya

金虫 (小有名气)
引用回帖:
27楼: Originally posted by 记小忆儿 at 2016-03-24 14:58:30
如果是细胞提取物做的，可以推荐一款适合细胞的试剂盒

不是，我做试剂开发的···
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28楼2016-03-25 12:38:03
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dylee

金虫 (著名写手)

Immunoassay-Man
引用回帖:
19楼: Originally posted by rambo_wy at 2016-02-11 19:19:58
抗体本身是澄清透明，连接biotin后是否出现混浊（比如乳白色？）的现象？

ＨＥＬＬＯ　rambo_wy，　我给抗体标记生物素时出现混浊（乳白色）现象，请问你如何看待这个现象后续又是如何解决的呢？谢谢．是因为ＢＩＯＴＩＮ偶联试剂比例太高吗？Because biotin, biotin-X, and biotin-XX are very　hydrophobic molecules, a high degree of biotinylation might increase the background or　might destabilize the antibody？　谢谢，盼回复．
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呃我没说我是好人吧
29楼2017-05-18 01:51:46
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