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关于真菌菌丝DNA的提取方法！
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大家好，小弟最近遇到一个提DNA的问题！我参见的是国外的一篇文献的方法：采取的冻融的方法。 1 刮取菌丝，悬浮于装有100微升无菌水微试管中； 2 -70°超低温冰箱冷冻3分钟（文献上是干冰上冻3分钟） 3 100°水浴融化，涡旋2分钟（文献上是75°融化） 4 重复3次冻融循环，最后一次融化时间15分钟 5 15700转下，离心5分钟 6 吸取6.25微升上清作PCR模板 结果是：我做了3次试验，可是电泳的结果是没有目标条带出现，之前用别的方法提取DNA，条带可以看见，不知道为什么用文献上的方法就是提取不出来呢？ 由于第一步从平板上刮菌丝会携带一部分琼脂，所以在第一步结束厚我先是用沸水煮了一下，然后转了一个微试管，目的是避免琼脂最后的干扰 高手们，帮我看看我是哪出了问题？关键是目前不知道这种方法DNA有没有提取出来！按理说，文献上的方法应该是可行的啊？谢谢指点！ |
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2楼2008-08-29 15:09:18
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