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关于真菌菌丝DNA的提取方法!
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大家好,小弟最近遇到一个提DNA的问题!我参见的是国外的一篇文献的方法:采取的冻融的方法。 1 刮取菌丝,悬浮于装有100微升无菌水微试管中; 2 -70°超低温冰箱冷冻3分钟(文献上是干冰上冻3分钟) 3 100°水浴融化,涡旋2分钟(文献上是75°融化) 4 重复3次冻融循环,最后一次融化时间15分钟 5 15700转下,离心5分钟 6 吸取6.25微升上清作PCR模板 结果是:我做了3次试验,可是电泳的结果是没有目标条带出现,之前用别的方法提取DNA,条带可以看见,不知道为什么用文献上的方法就是提取不出来呢? 由于第一步从平板上刮菌丝会携带一部分琼脂,所以在第一步结束厚我先是用沸水煮了一下,然后转了一个微试管,目的是避免琼脂最后的干扰 高手们,帮我看看我是哪出了问题?关键是目前不知道这种方法DNA有没有提取出来!按理说,文献上的方法应该是可行的啊?谢谢指点! |
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