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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 真菌DNA提取问题
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hxx593847830

新虫 (小有名气)

[求助] 真菌DNA提取问题 已有5人参与

最近在做真菌18S和ITS鉴定，使用液氮研磨、试剂盒提取DNA，已经做了一遍没有跑出条带。因为我是取了2ML菌液，自动研磨10min没有提取出来，猜想可能是提取DNA量少的原因。想问一下各位，试剂盒说是取真菌100mg，真菌菌液培养几天取样较好？取样的话取多少合适？另外，如果我用自动研磨机研磨多长时间好呢？希望有经验的大神指导！！
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1楼 2015-09-15 13:24:44
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rosesea1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by renzhiq at 2015-09-18 16:47:51
哈哈，你说的这个实验我比较熟悉。我做过，当初我也遇到过同样的问题。解决方法如下；
你可以将生长时间长的菌丝抽滤，用缓冲液漂洗后，在再用液氮碾磨
你也可以将生长短时间（菌体未老化）的菌液离心，用缓冲液漂洗 ...

你好 我需要做PCR 请问提取的时候必须用液氮研磨这一步吗 有什么替代方法吗
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我是学泡一碰就碎
14楼2019-05-06 10:28:40
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:41
量少的原因的话直接pcr就可以了 。p不出来就不是量少的问题了。可能没有裂解开。自动研磨没用过。提DNA液氮。或者普通研磨，玻璃珠等物理方法应该都差不多。

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2楼2015-09-15 13:38:42
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小可爱天

金虫 (小有名气)
为什么用菌液做？菌丝体做应该会有的。

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3楼2015-09-15 13:41:04
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小可爱天

金虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:48
把你养的菌抽滤，用菌丝体研磨提取做。

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4楼2015-09-15 13:42:03
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