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99蜗牛99新虫 (小有名气)
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T克隆，质粒连接，抓狂了！ 已有2人参与
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首先PCR获得了目的基因，之后尝试将目的基因与载体双酶切，然后用T4DNA连接酶16℃过夜连接，连接了很多次了，有的时候板上长菌很少，有的时候长菌很多，但菌落PCR验证的时候都没有目的条带。。。 然后试着把目的基因先连接到T载体上，可是刚刚PCR验证时，菌落PCR也没有目的条带，有些迷茫了，求前辈们指点。。。谢谢。。。 |
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兰兰园丁
木虫 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
99蜗牛99: 金币+1 2015-09-15 21:34:08
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
99蜗牛99: 金币+1 2015-09-15 21:34:08
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我也老遇到这种问题，但是，如果不是因为操作的错误的话，问题应该还是出在连接或者载体上。因为有的时候载体不同，发现做出来的可能也不同。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-15 00:10:33