| 查看: 2218 | 回复: 15 | |||
[交流]
各位，革兰氏阳性菌质粒老是提取不出来，但PCR又做的很成功的，这是怎么回事 已有6人参与
|
|||
|
我用的是EZMA质粒小提试剂盒，各位看看有没有什么要注意的地方 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有111人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:03
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:03
|
如果确定菌液中有质粒。质粒提取，溶液II比较重要。裂解的作用。加入溶液二之后有没变澄清。没变的话氢氧化钠失效。补加一些。如果澄清的话。应该是上注液的问题。上柱丢失，应该是试剂盒的问题。可以找厂家。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-09-11 23:37:34
baichi121234
禁虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2015-09-11 23:23:52
renzhiq
木虫 (小有名气)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 2106.1
- 红花: 9
- 帖子: 298
- 在线: 53.3小时
- 虫号: 1949303
- 注册: 2012-08-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:19
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:19
|
你用的什么菌？革阳大多数中的质粒拷贝数很低，不可从中直接提取。更不能完全按照质粒小提的方法提取，需要注意两点。一是破壁，二是防止核酸酶降解。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-09-12 08:23:50
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:38
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-13 23:01:38
|
这里不针对试剂盒提任何意见，前提是你选的适用这个菌株而且没有问题就好。 拷贝数是个大问题，而拷贝数与所用质粒种类和菌株特性有关，所谓的提不提的出来其实是量的问题，太少的话很难直接检测倒是事实。 菌液PCR假阳性率很高，一则严格的正负对照，二则得到条带不代表每个都能提取得到（指多克隆）。 祝好 发自小木虫Android客户端 |
5楼2015-09-12 08:55:17
6楼2015-09-12 09:33:29
7楼2015-09-12 09:33:54
8楼2015-09-12 09:34:36
9楼2015-09-12 09:36:13
10楼2015-09-12 09:38:38
