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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 求大神 看看图片 PCR图
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郭帅411422

新虫 (小有名气)

[求助] 求大神 看看图片 PCR图 已有2人参与

做了梯度PCR的结果，帮忙看看，第一个是MARKER，后面开始1-8个孔是一个样，9-16是一个样，最后8个是一个样。
用的是 ITS真核生物通用引物，1.5%的胶，
但是 大家可以看到 有好几个亮条带(在一个样上)为什么？求大神讲解

求大神 看看图片 PCR图
IMG_20150910_131350.jpg
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1楼 2015-09-10 19:58:53
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韩仁灿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是有的分解了，核酸反复冻融会分解的？？
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2楼2015-09-11 08:45:09
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MarchZR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
哎呀，亮带没关系，可以优化体系去除的，关键是你的目的条带得先出来啊，建议你升高一下退火温度看看，另外，也可能是你扩增的特异性太差了，建议换用高特异性的酶扩增，比如热启动聚合酶什么的，引物也自己blast验证~
提供一点资料，提高PCR扩增特异性的方法
http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-11 09:37:37
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