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郭帅411422

新虫 (小有名气)

[求助] 求大神 看看图片 PCR图 已有2人参与

做了梯度PCR的结果,帮忙看看,第一个是MARKER,后面开始1-8个孔是一个样,9-16是一个样,最后8个是一个样。
用的是 ITS真核生物通用引物,1.5%的胶,
但是 大家可以看到 有好几个亮条带(在一个样上)为什么?求大神讲解

求大神 看看图片 PCR图
IMG_20150910_131350.jpg
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韩仁灿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是有的分解了,核酸反复冻融会分解的??
2楼2015-09-11 08:45:09
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MarchZR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
哎呀,亮带没关系,可以优化体系去除的,关键是你的目的条带得先出来啊,建议你升高一下退火温度看看,另外,也可能是你扩增的特异性太差了,建议换用高特异性的酶扩增,比如热启动聚合酶什么的,引物也自己blast验证~
提供一点资料,提高PCR扩增特异性的方法
http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html
3楼2015-09-11 09:37:37
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