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黎花梦香

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 2353618
注册: 2013-03-17
性别: MM
专业: 细胞增殖、生长与分化

[求助] 将细胞接种到96孔板贴壁后，怎么将96孔板中的细胞消化下来已有3人参与

将细胞铺于96孔板，并培养贴壁后，怎么将96孔板中的细胞消化下来，我想给药之后将细胞破碎，再进行下步实验的，能告诉我具体步骤吗？

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1楼 2015-09-10 10:13:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

evangelina

无虫 (小有名气)

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专业: 病毒学

★ ★
黎花梦香(wizardfan代发): 金币+2, 感谢应助 2015-09-12 10:41:30

引用回帖:

5楼: Originally posted by 黎花梦香 at 2015-09-10 16:16:00
那胰酶加多少呢？
消化时间和在培养瓶中的消化时间应该有所不同吧？
消化好后是用枪吹细胞吗？
因为这时候细胞是否吹起光看外表应该不好判断吧，那应该怎么判断呢？
用来中和加的血清又加多少呢？...

我没有做过96孔的，因为觉得自己的手没那么灵巧，我做过最小是48孔的
48孔养细胞放300ul培养液，洗PBS一样300ul两次，胰酶100ul，消化时间要在显微镜下判断
既然你只需要收集细胞，胰酶处理过了点也没什么问题
然后再加200ul培养液去中和胰酶
再就直接用枪打下来吸走，从不同方向上下吹十来次，应该大部分都下来了
96孔应该要更少吧