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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于转染的一些问题，求讨论！
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sonny

金虫 (著名写手)

[交流] 关于转染的一些问题，求讨论！

目前在用Flp-In TRex-293做可诱导表达的稳转表达系，该细胞正常培养需要Zeocin和Blasticidin两种选择抗性维持，转染进外源重组质粒后，定点插入后会导致Zeocin抗性消失，获得Hygromycin B抗性，而Blasticidin抗性一直存在。

我的问题是：在做转染过程中，是否需要加入Blasticidin抗生素？？
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1楼 2015-09-08 19:53:46
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dmbb
★
sonny(金币+1): 谢谢参与
2楼2015-09-08 19:58:18
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shenrenren
3楼2015-09-08 20:17:04
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evangelina

无虫 (小有名气)
★ ★
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sonny: 金币+1 2015-11-29 20:45:12
转染过程不要加抗生素，转染后1天换培养液才加
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4楼2015-09-08 20:46:23
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月晓寒

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sonny: 金币+1 2015-11-29 20:45:43
楼主你好，我们实验室也需要flp in 293细胞，你可以分给我一支细胞吗？用其他菌株或者质粒来换？
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5楼2015-11-05 17:46:17
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sonny: 金币+1 2015-11-29 20:46:05
我们转染一般也不加抗性

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6楼2015-11-05 22:26:19
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★ ★
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sonny: 金币+1 2015-11-29 20:46:12
楼主要做什么转染瞬时转染还是要进行稳转细胞系构建，转染这个过程是不需要抗性的，等转染结束了换培养基可以加入抗性，稳转株筛选的话将目的基因整合到细胞自身的基因组上，楼主说的定点插入导致抗性消失是否可以避免。。
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-11-09 17:04:40
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sonny

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 月晓寒 at 2015-11-05 17:46:17
楼主你好，我们实验室也需要flp in 293细胞，你可以分给我一支细胞吗？用其他菌株或者质粒来换？

不好意思，我们是公司，不太方便，谢谢
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8楼2015-11-29 20:45:59
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