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4031431912

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我看下我的电泳图,为什么泳道不清晰,总是这样,谢谢~~ 已有1人参与

possesse
我用的是2*Es Taq MasterMix(含染料),所以我只加引物和模板,双蒸水就好了。左边四道是25微升体系(Mix 12.5微升,引物 1微升,模板 1微升,水补齐),中间是Marker,右边四道是15微升体系(Mix 7.5微升,引物 0.6微升,模板0.6微升,水补齐),我师姐也用这个Mix,跑的挺好的。不知道我的问题出在哪儿了,

大家帮我看下我的电泳图,为什么泳道不清晰,总是这样,谢谢~~
Administrator 2015-09-05 14 小时 44 分钟.jpg
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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4031431912: 金币+5, 有帮助 2015-09-06 09:59:43
电泳很清晰啊,不用纠结,调整一下曝光时间见好了。如果还不满意换孔径大一点的梳子,提高上样量,应该会有明显改善。还有电泳时间太长了,部分marker都跑出去了。
2楼2015-09-05 16:35:36
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4031431912

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dorecnu at 2015-09-05 16:35:36
电泳很清晰啊,不用纠结,调整一下曝光时间见好了。如果还不满意换孔径大一点的梳子,提高上样量,应该会有明显改善。还有电泳时间太长了,部分marker都跑出去了。

再请你帮我看下这个图,麻烦了。我是单引物扩增,这个是同一个模板,8个不同引物,相同的梯度退火温度,PCR产物。不知道什么问题导致条带弯曲不清晰,是因为上样量多吗?另外胶孔为什么是量的,是因为反应没有完全?胶孔亮是由于Taq 酶吗?

大家帮我看下我的电泳图,为什么泳道不清晰,总是这样,谢谢~~-1
3楼2015-09-06 10:06:30
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
3楼: Originally posted by 4031431912 at 2015-09-06 10:06:30
再请你帮我看下这个图,麻烦了。我是单引物扩增,这个是同一个模板,8个不同引物,相同的梯度退火温度,PCR产物。不知道什么问题导致条带弯曲不清晰,是因为上样量多吗?另外胶孔为什么是量的,是因为反应没有完全 ...

跑的还可以啊,只要目的条带出来了就好,稍微优化一下条件就好了,胶孔亮正常 有点挂孔而已,没大事,看一下资料稍微优化下就更完美了http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-09-07 09:43:18
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