应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 目的蛋白分泌到了周质中怎样才能让它主要存在于细胞外的培养基中
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1039  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

honger982896

银虫 (初入文坛)

[交流] 目的蛋白分泌到了周质中怎样才能让它主要存在于细胞外的培养基中

如题，有好的方法或建议请赐教！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-08-25 22:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxy71723

铜虫 (小有名气)
搭车同问，谢谢
回复此楼
2楼2008-08-26 15:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yqhc

金虫 (小有名气)
培养结束，离心培养液，利用某些缓冲液（PB）再溶解，目的蛋白基本可以转移到溶液中。
赞一下 回复此楼
3楼2008-08-26 17:01:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

playboy723

金虫 (正式写手)
目的蛋白加了信号肽了？
赞一下 回复此楼
4楼2008-08-26 22:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxy71723

铜虫 (小有名气)
培养结束，离心培养液，利用某些缓冲液（PB）再溶解，目的蛋白基本可以转移到溶液中?
这样就能使从目的蛋白从周质转移到培养基中了么？？？
赞一下 回复此楼
5楼2008-08-27 09:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lliu

新虫 (小有名气)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
经典文献中是选用蔗糖渗透法，但我试过几次，效果不好（产量低）。我们这里通用的方法如下：

离心回收你的细胞，溶解在适量的PBS或其他Buffer中（OD600=10左右即可）。

1。Freeze/Thaw法：液氮5分钟，37C10分钟，反复5次。离心取上清。
或者
2。Promega公司的FastBreak效果也不错。
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2008-08-28 03:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

honger982896

银虫 (初入文坛)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流
离心回收你的细胞，溶解在适量的PBS或其他Buffer中（OD600=10左右即可）。

1。Freeze/Thaw法：液氮5分钟，37C10分钟，反复5次。离心取上清。
或者
2。Promega公司的FastBreak效果也不错。
感谢回复，蔗糖渗透法我也做了，效果也不是很好。我的目的是让周质的蛋白进入到培养液中这样周质中还能源源不断的产生蛋白，从而提高表达量，我试过溶菌酶，效果也不好，各位大侠还有别的法子没？？
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-09-01 08:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyfu

金虫 (小有名气)
我以前曾实现在发酵过程中将在胞质内表达的硫氧还融合蛋白释放至培养基中，后来发现这种方法也适用于释放一些分泌至周质的重组蛋白。建议你试一试。可以参考我的文章：Extracellular production of human parathyroid hormone as a thioredoxin fusion form in Escherichia coli by chemical permeabilization combined with heat treatment. Biotechnology Progress, 2005, 21 (5): 1429 -1435.
赞一下 回复此楼
8楼2008-09-04 21:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 honger982896 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分 化工与材料 +3 海纳百川Ly 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:18 by 杨杨杨紫
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +3 hanamiko 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:08 by lbsjt
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 269专硕求调剂 +10 金恩贝 2026-03-21 10/500 2026-03-27 15:10 by caszguilin
[考研] 339求调剂 +4 烤麦芽 2026-03-27 5/250 2026-03-27 13:23 by 752105528
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭