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honger982896

银虫 (初入文坛)

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在线: 3.2小时
虫号: 516852
注册: 2008-03-03
性别: MM
专业: 食品科学基础

[交流] 目的蛋白分泌到了周质中怎样才能让它主要存在于细胞外的培养基中

如题，有好的方法或建议请赐教！！

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1楼 2008-08-25 22:00:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

honger982896

银虫 (初入文坛)

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专业: 食品科学基础

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xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流

离心回收你的细胞，溶解在适量的PBS或其他Buffer中（OD600=10左右即可）。

1。Freeze/Thaw法：液氮5分钟，37C10分钟，反复5次。离心取上清。
或者
2。Promega公司的FastBreak效果也不错。
感谢回复，蔗糖渗透法我也做了，效果也不是很好。我的目的是让周质的蛋白进入到培养液中这样周质中还能源源不断的产生蛋白，从而提高表达量，我试过溶菌酶，效果也不好，各位大侠还有别的法子没？？