24小时热门版块排行榜    

查看: 2837  |  回复: 5

biyygyxkjsun

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于siRNA与shRNA的选择问题 已有2人参与

我打算开展细胞干扰试验,因为我做用的细胞为鸭的原代成肌细胞,转染方式为脂质体转染。所以不知道该选择哪一种干扰方式合适?目前已了解到,shRNA相对较难转染入至原代细胞中,但也不知道siRNA是否相对较为容易转入细胞中。病毒干扰载体是不考虑的,太贵了。恳请各位大侠指导下小弟。
回复此楼
探索本质
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
siRNA 是合成的,从公司买回来,可以直接用于短暂性的转染,用完就没有了。优点是快速便利。
shRNA 是基于质粒的。需要自己克隆,也有公司卖不过较自己克隆要贵得多。
因为是质粒,所以可以无限制的扩增,不会有用完的一天。
质粒的转染效率跟siRNA类似,不过shRNA被表达出来需要时间,所以效果可能没有siRNA直接快速。
但是shRNA质粒一般含有抗生素选择基因,这就允许你筛选稳定细胞系,不过这个很花时间(1-3个月)
不过一旦稳定细胞系筛选成功,你就再不用做转染实验了,一劳永逸。
所以两者各有所长,要看你的实验性质。
如果只是补个数据,果断用siRNA。如果建立起稳定细胞体系以后还有很多实验,建议用shRNA。
2楼2015-09-03 19:41:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨夜带伞

金虫 (小有名气)

Mark一下
3楼2016-05-06 18:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysk1989

新虫 (小有名气)


原代细胞不容易转,而脂质体转染效率不高,所以我很担心您实验的成功率。我建议您换一种转染试剂。我们实验室现在用的是英格恩生物的转染试剂R4000,专门针对RNA转染,原代细胞、悬浮细胞和敏感细胞都可以转,而且他家的试剂是纳米材料的,效果优于脂质体,可以试一下。
4楼2016-07-28 11:21:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

原代细胞一般是从活体组织中获取的细胞,细胞体系比较复杂,不稳定,原代培养具有两个特点接触抑制和贴壁生长,原代细胞的转染要比一般传代的细胞难很多,BIODAI可以转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA。
5楼2019-10-16 15:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddtao

新虫 (小有名气)


免费试用
6楼2019-12-07 19:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 biyygyxkjsun 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +9 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 9/450 2026-08-13 15:45 by GGlceF2k3sb4
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +5 医学老男孩 2026-08-13 11/550 2026-08-13 15:41 by sdfapple719
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见