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biyygyxkjsun铁虫 (小有名气)
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[求助]
关于siRNA与shRNA的选择问题 已有2人参与
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| 我打算开展细胞干扰试验，因为我做用的细胞为鸭的原代成肌细胞，转染方式为脂质体转染。所以不知道该选择哪一种干扰方式合适？目前已了解到，shRNA相对较难转染入至原代细胞中，但也不知道siRNA是否相对较为容易转入细胞中。病毒干扰载体是不考虑的，太贵了。恳请各位大侠指导下小弟。 |
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 miRNA分子生物学研究 |
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4楼2016-07-28 11:21:03
evangelina
无虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
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- 红花: 3
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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siRNA 是合成的，从公司买回来，可以直接用于短暂性的转染，用完就没有了。优点是快速便利。 shRNA 是基于质粒的。需要自己克隆，也有公司卖不过较自己克隆要贵得多。 因为是质粒，所以可以无限制的扩增，不会有用完的一天。 质粒的转染效率跟siRNA类似，不过shRNA被表达出来需要时间，所以效果可能没有siRNA直接快速。 但是shRNA质粒一般含有抗生素选择基因，这就允许你筛选稳定细胞系，不过这个很花时间（1-3个月） 不过一旦稳定细胞系筛选成功，你就再不用做转染实验了，一劳永逸。 所以两者各有所长，要看你的实验性质。 如果只是补个数据，果断用siRNA。如果建立起稳定细胞体系以后还有很多实验，建议用shRNA。 |
2楼2015-09-03 19:41:34
5楼2019-10-16 15:03:53