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cq_noah金虫 (正式写手)
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[求助]
高质量总RNA提取 已有1人参与
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用TRIzol对总RNA进行提取，最后一步，在55-60度的水中孵育10-15分钟，这一步的目的是干什么啊？ 我的目的是做RNA提取的质控，所以我要保证高质量的提取总RNA，也就是尽量避免RNA的降解，55度会不会导致RNA物理性的断裂？ |
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evangelina
无虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
cq_noah: 金币+20, ★★★很有帮助, 我觉得影响还是挺大的，因为大多数情况大家提RNA后就逆转了，如果跑个胶或者做个毛细管电泳，降解还是挺明显的，只是部分RNA降解对于RT-PCR影响并不是很大， 2015-09-02 14:36:43
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cq_noah: 金币+20, ★★★很有帮助, 我觉得影响还是挺大的，因为大多数情况大家提RNA后就逆转了，如果跑个胶或者做个毛细管电泳，降解还是挺明显的，只是部分RNA降解对于RT-PCR影响并不是很大， 2015-09-02 14:36:43
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让RNA完全并均匀的溶解在水里面。只要你的管子和水都是RNAse Free，操作够干净的话，就不怕降解。 55度15分钟一般不会造成RNA断裂，不过不要太长，例如超过半小时就不太好。 这一步很重要的，不做好的话RNA浓度会很低，因为没有充分溶解。 最好这十五分钟内，每隔五分钟用手指轻轻弹几下管子，促进RNA溶解。 |
2楼2015-09-01 14:25:52
3楼2015-09-02 09:20:43
fangston
新虫 (正式写手)
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