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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 染细菌生物膜的0.5%结晶紫溶液怎么配置！
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君子竹

铜虫 (初入文坛)

[求助] 染细菌生物膜的0.5%结晶紫溶液怎么配置！ 已有1人参与

请问有人做过结晶紫染色细菌生物膜的吗？文献中关于结晶紫的配置方法有很多中，（1）结晶紫用95%乙醇溶解后跟草酸铵水溶液混合使用；（2）直接用蒸馏水溶解配置成所需要的质量分数（3）直接用无水乙醇或甲醇溶解，请问文献中说的0.5%或0.1%的结晶紫溶液是怎么配置的呢？麻烦各位虫友帮忙，谢谢
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1楼 2015-09-01 14:14:35
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君子竹

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by smilingworld at 2015-09-01 15:44:04
楼主说的方法都可以。1%结晶紫溶液，方法1: 结晶紫染色液： 结晶紫 1 g；95％乙醇 20 ml；1％草酸铵水溶液 80 ml，将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 或者用蒸馏水以及无水乙醇直接溶解。或者5mg 结晶紫 ...

您说的根据细菌形成生物膜的强弱，选择合适的方法，怎么选择呢？还有，结晶紫与95%乙醇的比例是多少，因为您上面说的“5mg 结晶紫溶于5 ml 无水乙醇＋45 ml 蒸馏水”，最后的比例不是1%吧，应该只有0.05%，文献上不一致的是结晶紫用95%乙醇溶解的体积不一样，我搞不明白应该用是多少乙醇来溶解结晶紫，这个比例有没有什么要求呢？？谢谢
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3楼2015-09-03 23:15:46
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smilingworld

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主说的方法都可以。1%结晶紫溶液，方法1: 结晶紫染色液： 结晶紫 1 g；95％乙醇 20 ml；1％草酸铵水溶液 80 ml，将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 或者用蒸馏水以及无水乙醇直接溶解。或者5mg 结晶紫溶于5 ml 无水乙醇＋45 ml 蒸馏水。我以前做过biofilm的染色，我记得我用的是0.25%的染液，直接溶于蒸馏水中。楼主可根据细菌形成生物膜的强弱，选择合适的方法，但是基本差不多。
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2楼2015-09-01 15:44:04
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smilingworld

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 君子竹 at 2015-09-03 23:15:46
您说的根据细菌形成生物膜的强弱，选择合适的方法，怎么选择呢？还有，结晶紫与95%乙醇的比例是多少，因为您上面说的“5mg 结晶紫溶于5 ml 无水乙醇＋45 ml 蒸馏水”，最后的比例不是1%吧，应该只有0.05%，文献上不 ...

楼主你是怎么算的“5mg 结晶紫溶于5 ml 无水乙醇＋45 ml 蒸馏水”最后的比例是0.05%的？还有我没有说它是1%，是0.1%。我在上面说过了，最后配置的结晶紫溶液，效果差不多，合适的方法，无非根据菌的生物膜形成强弱情况看看所用的结晶紫的浓度是否适合。用不一致的乙醇体积溶解，是不是不同浓度结晶紫溶液？还有，你用我说上面说的方法1跟5 ml 无水乙醇＋45 ml 蒸馏水，最后乙醇的体积也不一样！
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4楼2015-09-04 12:21:46
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G号糖

木虫 (正式写手)
后面我也要做这个多多交流
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5楼2015-10-14 09:28:53
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