应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跪求大神指点关于ppic9k载体在酵母中表达
51/1返回列表
查看: 2211  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

[求助] 跪求大神指点关于ppic9k载体在酵母中表达 已有3人参与

各位大神好，本人分子生物小菜鸟一个。想请教一下关于蛋白用ppic9k这个载体在毕赤酵母中表达方面的知识。
之前我用Bgl2这个酶线性化，毕赤酵母表达手册里面说用这个酶线性化之后电转化酵母得到的是Mut+表型，提取酵母基因组鉴定，用AOX1通用引物时理论上应该能得到两个条带，一个是完整的AOX1基因片段，一个是目的基因片段加上470bp，我的目的基因是500bp左右，因此还有一条条带应该是1000bp左右。结果我的电泳结果显示只有一条1000bp左右的条带，这正常吗？这是为什么呢？
然后我再用目的片段的特异性引物做的验证，电泳结果有一条很目的片段大小差不多的500bp左右的条带。这样我能接着往下进行试验吗？这个现象好像是Muts表型啊。听说Muts表型表达比较慢，是有多慢呢？
问题有点蠢，希望大神多多包涵！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-08-26 17:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
来人啊
回复此楼
4楼2015-08-27 15:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
哎呀我说错了 我线性化用的是Sal1这个酶

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-26 17:59:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
我想问下，你是怎么提的酵母基因组啊，谢谢
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
5楼2015-09-07 08:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

-字仲康

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2015-10-16 11:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 7/350 2026-09-03 13:20 by T0rGB46095mJ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 13:20 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +10 雨打竹帘 2026-08-30 14/700 2026-09-03 13:17 by qsd10086
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:05 by T0rGB46095mJ
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:03 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 4/200 2026-09-03 03:14 by rM1TE0WVDIIY
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 6/300 2026-09-02 23:59 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭