| 查看: 905 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
载体构建 已有4人参与
|
||
一个CDS区大小为4000bp的基因，想构载体，可是设计好了引物从ATG开始到TGA 结束，怎么也跑不出来，这个基因有7种剪接体，一个都跑不出来，有什么好的解决方法吗 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有139人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
送红花一朵 
3楼2015-08-26 11:20:15
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2015-08-26 11:11:01
evangelina
无虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: -31.9
- 红花: 3
- 帖子: 135
- 在线: 58.4小时
- 虫号: 3180737
- 注册: 2014-05-05
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2015-08-26 23:06:07
jiashuhua29: 金币+20 2015-08-28 09:58:48
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2015-08-26 23:06:07
jiashuhua29: 金币+20 2015-08-28 09:58:48
|
你可以试试把它拆分成两个片段，用overlapping PCR去做 例如说分成两个2k的片段，一般就比较好做PCR，先克隆到T载体，测序，如有变异先把它变回来 然后就用头尾的引物做PCR，再把全长片段克隆到目标载体 4k的基因如果直接克隆，如果是从cDNA会有的困难的 除非你用比较高级的逆转录酶和高保真酶 如果有钱的话，直接叫公司给你合成吧 又或者如果是很普遍的基因，直接从addgene之类的公司买，很便宜的 |
4楼2015-08-26 11:25:49
5楼2015-08-26 11:33:34
