24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5312  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)

[求助] 【新手求助】RNA纯度低对接下来反转录、real-time PCR影响大吗?有什么补救方法吗? 已有1人参与

细胞沉淀用TRIZol法提的,目的是看一下瞬转是否成功效率如何。纯度不高,A260/280分别为1.44、1.65、1.67、1.94。下一步计划是做反转录,real-time PCR,不需要很精确,只想大概知道转染成功与否。请问这样影响大吗?或者有什么补救的方法,因为重提涉及很多麻烦的东西。谢谢大神指导!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljq1027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zjy000999 at 2015-08-26 09:39:19
买的公司出的mimic和inhibitor,想p一下miRNA
...

我不做miRNA,但是它们都这么短,你用什么引物逆转录呢?
无可奈何花落去,似曾相识燕归来~
7楼2015-08-26 10:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

ljq1027

金虫 (小有名气)

如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话,这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话,涉及到定量了,只能重提RNA了。
无可奈何花落去,似曾相识燕归来~
2楼2015-08-26 00:34:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-26 00:34:29
如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话,这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话,涉及到定量了,只能重提RNA了。

转的是mirna呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-08-26 06:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-26 00:34:29
如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话,这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话,涉及到定量了,只能重提RNA了。

多谢回答!补充一下,转的是MiRNA,只想初步地定性地看一下转染是否成功,不需要定量效率~这种情况呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-08-26 06:35:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +8 @taotao 2026-04-03 8/400 2026-04-04 01:04 by userper
[考研] 311(085601)求调剂 +15 liziyeyeye 2026-03-28 16/800 2026-04-03 21:43 by qlm5820
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +12 hyz0119 2026-03-31 13/650 2026-04-03 18:33 by ls刘帅
[考研] 321求调剂 +10 认真求上学 2026-04-02 10/500 2026-04-03 16:17 by lijunpoly
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 一志愿华东理工大学,080500学硕,317分,求调剂 +13 s1145 2026-03-31 15/750 2026-04-03 11:44 by msi123
[考研] 296材料专硕求调剂 +20 202451007219 2026-04-02 21/1050 2026-04-03 11:15 by wangjy2002
[考研] 复试调剂 +3 bvzz 2026-04-01 3/150 2026-04-03 09:47 by 蓝云思雨
[考研] 326求调剂 +3 9ahye 2026-04-02 4/200 2026-04-03 08:43 by Jaylen.
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突,
[考研] 求生物学调剂 +10 15172915737 2026-04-01 10/500 2026-04-02 18:53 by 哦哦嗯哈
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 291求调剂 +3 迷蒙木木 2026-04-01 4/200 2026-04-01 11:07 by 逆水乘风
[考研] 318求调剂 +10 陈晨79 2026-03-30 10/500 2026-03-31 17:37 by 544594351
[考研] 353求调剂 +3 江上枫_26 2026-03-28 3/150 2026-03-31 15:53 by jp9609
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
信息提示
请填处理意见