应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 【新手求助】RNA纯度低对接下来反转录、real-time PCR影响大吗？有什么补救方法吗？
51/1返回列表
查看: 5194  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)

[求助] 【新手求助】RNA纯度低对接下来反转录、real-time PCR影响大吗？有什么补救方法吗？ 已有1人参与

细胞沉淀用TRIZol法提的，目的是看一下瞬转是否成功效率如何。纯度不高，A260/280分别为1.44、1.65、1.67、1.94。下一步计划是做反转录，real-time PCR，不需要很精确，只想大概知道转染成功与否。请问这样影响大吗？或者有什么补救的方法，因为重提涉及很多麻烦的东西。谢谢大神指导！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-08-25 23:51:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-26 00:34:29
如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话，这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话，涉及到定量了，只能重提RNA了。

多谢回答！补充一下，转的是MiRNA，只想初步地定性地看一下转染是否成功，不需要定量效率~这种情况呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-26 06:35:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

ljq1027

金虫 (小有名气)
如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话，这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话，涉及到定量了，只能重提RNA了。
赞一下(1人) 回复此楼
无可奈何花落去，似曾相识燕归来~
2楼2015-08-26 00:34:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjy000999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-26 00:34:29
如果转染的基因和细胞不是同一个种属的话，这个可以用来确定转染是否成功。但是要确定效率的话，涉及到定量了，只能重提RNA了。

转的是mirna呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-26 06:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljq1027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zjy000999 at 2015-08-26 06:35:23
多谢回答！补充一下，转的是MiRNA，只想初步地定性地看一下转染是否成功，不需要定量效率~这种情况呢？
...

如果转的是miRNA，当时为什么不用偶联荧光基团的RNA确定是否能转染成功呢。而且你做qPCR想P的是作用的目标基因？
赞一下(1人) 回复此楼
无可奈何花落去，似曾相识燕归来~
5楼2015-08-26 09:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭