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cherryfyx

新虫 (初入文坛)

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[求助] 稀释涂布计数菌落的时候是怎么稀释混匀的？已有3人参与

我之前做稀释涂布都很正常，可是最近涂布的平板总是不长菌，即使一个样品涂8个平行也都不长菌，很奇怪，期初怀疑是稀释用振荡器没有混匀。后来改用枪吹吸20次，可还是不行，真的不明白了，大家稀释混匀的到时候都是怎么混匀的啊

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1楼 2015-08-25 09:42:50

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smilingworld

新虫 (小有名气)

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专业: 病原细菌、细菌感染与宿主

引用回帖:

7楼: Originally posted by cherryfyx at 2015-08-31 10:44:15
嗯，我从斜面上直接划线到平板上长出菌了，后来又将原液稀释100—10-8然后涂布也都长了，说明培养基是没问题的，可是又做一次是先将原液稀释1、2、4、8、16倍然后再分别稀释100-10-8涂布，又出现了只有稀释8倍的原 ...

画线培养然后溶解到生理盐水中当作的原菌液么？楼主请先确认这种细菌在生理盐水中是否会存活，换成无菌蒸馏水试试。而且，楼主把原菌液稀释1，2，4，8，16倍后再做培养基涂布，只有稀释8倍的涂布后培养基上有菌，其余的都没有？8倍稀释原液后长出的菌落很多么，比如稀释倍数低的菌落数不清，稀释倍数高的有几十几百个？给楼主一些个人建议：1. 稀释细菌的时候换成无菌蒸馏水或者PBS试一试；2. 确定原菌液的浓度，就是测过OD后，涂布到培养基，看看CFU究竟有多少；3. 原菌液稀释1，2，4，16倍后的菌液，直接涂布到培养基上，不要做稀释，看看1，2，4，16倍稀释后的液体中，有没有菌。4. 个人认为不是振荡混匀的问题。一些菌假如放置在营养匮乏的液体中较长时间，菌的细胞会发生变化，会存活，但是不会分裂生长。假如不研究长时间放置细菌的代谢变化，最好使用新培养的。