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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 活菌计数~
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宁夏可可

新虫 (初入文坛)

[求助] 活菌计数~

我在做枯草芽孢杆菌活菌计数，通过平板稀释涂布，可是结果总是偏高啊，做到10-9，我是用7ml离心管吸0.5ml发酵液加到4.5ml水中，逐步稀释的~做了很多遍了~还有菌落有大有小 ，计数时主观因素貌似很大，哪些数哪些不数啊？谢谢 ~
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1楼2012-05-24 17:40:08
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nanhaiyisu

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎交流^_^ 2012-05-26 23:22:41
个人感觉平板计数很难做到数据稳定，增加平行个数，统一计数的标准（培养时间、计数人员主观差异、菌落大小等）。
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2楼2012-05-24 22:30:02
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429066297

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你不是稀释了9个梯度嘛，你看不同的梯度之间是不是10倍的关系，是的话说明操作问题不大；你菌落有大有小，说明稀释过程中被污染了或者是本身菌液就不是纯菌。不过涂布法本身误差就是大
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每一个际遇都有它存在的价值
3楼2012-05-24 22:55:15
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edcf

铜虫 (小有名气)
每次取0.1ml到9.9ml水中，可以稀释100呀。
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4楼2012-05-25 13:07:52
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hechenghasuc

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2012-05-25 15:10:12
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宁夏可可

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by edcf at 2012-05-25 13:07:52
每次取0.1ml到9.9ml水中，可以稀释100呀。

0.1ml害怕误差大，之前做的高，又担心没摇匀就增大了倍数了。。。
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6楼2012-05-25 15:16:38
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宁夏可可

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 429066297 at 2012-05-24 22:55:15
你不是稀释了9个梯度嘛，你看不同的梯度之间是不是10倍的关系，是的话说明操作问题不大；你菌落有大有小，说明稀释过程中被污染了或者是本身菌液就不是纯菌。不过涂布法本身误差就是大

无菌操作台操作的啊 ，一般我都是24h，然后就计数，会有些小菌落吧，这要做到猴年马月才能做出结果啊 ，急啊~
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7楼2012-05-25 15:17:34
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宁夏可可

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nanhaiyisu at 2012-05-24 22:30:02
个人感觉平板计数很难做到数据稳定，增加平行个数，统一计数的标准（培养时间、计数人员主观差异、菌落大小等）。

菌培养24h，一般计数起来的话是多小的就不计了？~
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8楼2012-05-25 15:19:44
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★
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zhang8826857: 金币+1, 欢迎交流^_^ 2012-05-26 23:22:49
先拍照，再延长培养时间，看看小菌落长大之后是不是和大菌落的形态一样，细菌的生长也会有空间位阻的，长得太密了菌落长不开的，在开阔的地方长得会稍大。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2012-05-26 00:26:20
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎交流^_^ 2012-05-26 23:22:59
这种稀释涂布什么的，就是要玩了命的稀释，不要怕浓度太低，你认为已经很低的浓度，说不定它长得好好的。

我以前也是怕菌浓度太低，没太敢稀释，结果长出来全是一片一片的。
不过要是你真的已经做到10-9还不行的话，那就有点悲剧了。 可是你还是可以再稀释啊。

不过涂布的时候要注意细节，其实涂布是个细致活。
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10楼2012-05-26 09:24:42
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