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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物大小比引物距离大很多，什么原因
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爱起点

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物大小比引物距离大很多，什么原因

如图，最左边是DL500maker，最上面是500pb，间隔100bp吗，maker右边三个是三个引物P出来以后的结果，第一条不太明显，大概450bp左右，第二个有两条带，第三个大概400bp左右，现在的问题是，我用的NCBI在线设计的引物，三个引物的产物大小应该是145bp，138bp，172bp，现在pcr产物的大小明显大很多，这是什么原因，请各位大侠多多指教。

PCR产物大小比引物距离大很多，什么原因
1.jpg
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1楼 2015-08-23 20:17:08
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-23 22:54:22
首先，是marker不是maker...
你的marker跑出来的也不是很亮啊，你先改进一下你的电泳条件，该洗的都先洗干净换一换，然后才能判断是引物还是模板问题
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2015-08-23 21:21:31
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铁拳虎

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
祝楼主万事顺意，心想事成，羊年发大财！！！
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2楼2015-08-23 20:29:05
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爱起点

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-23 21:21:31
首先，是marker不是maker...
你的marker跑出来的也不是很亮啊，你先改进一下你的电泳条件，该洗的都先洗干净换一换，然后才能判断是引物还是模板问题

不是电泳的问题，谢谢。
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4楼2015-08-24 09:01:14
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hanyu426980

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物特异性不高，最好blast一下你的引物和你的模板序列
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5楼2015-08-24 11:15:31
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