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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

[求助] 有关分离度问题 已有6人参与

我在摸索方法的时候,样品与杂质的分离度可以达到2.0,然后在进行方法学验证的时候,做了几天分离度都能达到要求,但是在做耐用性的时候,做对照样品,也就是正常样品的时候分离度就只有1.7左右,做耐用性条件都不合格。然后冲柱子再做正常条件,分离度就不合格,我想知道这个是方法问题还是柱子的问题?怎么解决?
注:杂质在分不开的情况下,理论塔板数降低了很多。
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菜鸟一枚,大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

ruier8873: 回帖置顶 2015-08-12 09:35:53
引用回帖:
18楼: Originally posted by ruier8873 at 2015-08-12 08:05:23
都用过了,冲了好久,冲完之后分离度反到更差了,是柱子不行了么...

乙腈冲完,你用异丙醇冲冲试下。有可能柱子不行了~
19楼2015-08-12 08:58:08
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shandaminmin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主用的什么流动相,什么柱子,柱效降的这么快的话,可能你选用的柱子不适合。
22楼2015-08-12 14:11:02
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普通回帖

longyi706565

金虫 (正式写手)

可能是柱子的问题,方便的话,把前后色谱图看看
2楼2015-08-11 13:46:50
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xiaoguaijing

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流动相是什么?色谱条件?
3楼2015-08-11 13:58:56
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
柱效下降,造成分离度降低,你把柱子好好冲一下,然后再试试看。
4楼2015-08-11 14:00:24
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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

引用回帖:
4楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-08-11 14:00:24
柱效下降,造成分离度降低,你把柱子好好冲一下,然后再试试看。

主峰的柱效并没有降低,还是一样的,就是杂质的变低了,柱子已经冲了一天了,还有别的原因么
菜鸟一枚,大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
5楼2015-08-11 14:12:26
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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoguaijing at 2015-08-11 13:58:56
流动相是什么?色谱条件?

10mm磷酸氢二钠 :甲醇=42:58
柱温40度,流速1.0
菜鸟一枚,大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
6楼2015-08-11 14:13:28
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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

引用回帖:
2楼: Originally posted by longyi706565 at 2015-08-11 13:46:50
可能是柱子的问题,方便的话,把前后色谱图看看

柱子主峰的柱效并没有降低,分离度下降的色谱图就是杂质快包在主峰后面了。
菜鸟一枚,大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
7楼2015-08-11 14:14:18
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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoguaijing at 2015-08-11 13:58:56
流动相是什么?色谱条件?

流动相中磷酸二氢钠的pH =4.0
菜鸟一枚,大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
8楼2015-08-11 14:14:57
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ruier8873 at 2015-08-11 14:12:26
主峰的柱效并没有降低,还是一样的,就是杂质的变低了,柱子已经冲了一天了,还有别的原因么...

你冲柱子一般怎么冲的?
9楼2015-08-11 14:44:07
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电科---微固

木虫 (职业作家)

祝你好运!!!加油!!!
科研
10楼2015-08-11 14:45:58
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